Cengiz KIRMAZPapatya DEĞİRMENCİ BAYRAKMustafa DEĞİRMENCİ2024-07-242024-07-242019http://akademikarsiv.cbu.edu.tr:4000/handle/123456789/24058Toll like reseptörler (TLR) evrimsel olarak korunmuş ve mikroorganizmalara ait kalıp yapıların tanınmasını sağlayarak immün sistemi aktive eden reseptörlerdir. TLR3, TLR7 ve TLR9 tipleri hücre içerisinde yer alır ve bakteri ya da virüs kaynaklı DNA/RNA moleküllerini tanır. TLR moleküllerinin immün hücreler dışında tümör hücreleri ve mezenkimal kök hücreler (MSC) tarafından da ifade edilebildiği bilnmektedir. Ancak bu hücrelerde oluşturdukları etkiler immün hücrelerden oldukça farklı olabilmektedir. Bu çalışmada amacımız TLR3, TLR7 ve TLR9 agonistlerinin NK-92 hücrelerinin meme tümör hücreleri MDA-MB-231 ve MCF7 üzerinde oluşturduğu etkileri ve bu etkilerin MSC varlığında nasıl etkilendiğini ortaya koymaktır. Bu amaçla MSC, MDA-MB-231, MCF7 hücrleri birbirleri ve NK-92 hücreleri ile kültür edilirken TLR3, TLR7, TLR9 ve bu üç agonistin toplu olarak uygulandığı deneyler gerçekleştirdik. Deneyler sonunda topladığımız NK-92 hücrelerinde anti-tümör etkinin oluşmasında ve baskılanmasında rol alan sitokin ve moleküller olan IFN-γ, TNF-α, IL-10, TGF-β1, Granzyme B, Perforin, NF-κBi MYD88 ve TRIF’in mRNA ekspresyonlarını değerlendirdik. Sitotoksik etkinliği değerlendirmek için ise WST-1 analizleri yaparak yüzde sitotoksik aktivite düzeylerini karşılaştırdık. Tüm TLR uyarılarının MDA-MB-231 ve MCF7 hücreleri ile kültüre edilen NK-92 hücrelerindeki IFN-γ, TNF-α ile Granzyme B, Perforin ifadelerini anlamlı olarak arttırdığını tespit ettik. Ancak TLR uyarısı olmasına rağmen ortamda bulunan MSC’ler bu ifadeleri anlamlı olarak baskıladı. TLR9 uyarımı ve MDA hücreleri ile yapılan deneylerde IFN-γ, TNF-α ekspresyonları istisnai bir şekilde MSC varlığında artış gösterirdi. Sitotoksik aktiviteye baktığımızda ilginç bir şekilde tek başına uygulanan TLR uyarımlarının toplu TLR uyarımlarından daha etkin olduğunu tespit ettik. Burada da MSC varlığı sitotoksik etkinin azalmasına yol açtı. Sonuç olarak TLR uyarıları yapılsa bile MSC’lerin NK-92 hücrelerinin anti-tümör etkinliklerini baskılayabildiğini, ancak TLR9 uyarısının farklı bir etki yolu üzerinden anti-tümör etkinliği arttırmış olabileceğini tespit ettik. Daha kesin bir yorum yapabilmek için elde ettiğimiz verilerin, in-vivo çalışmalar ile desteklenmesine gereksinim vardır.tur[Fen > Tıp > Onkoloji, Fen > Tıp > İmmünoloji]