Nöroblastoma Hücre Kültüründe Glutamat Aracılı Oluşturulan Nörotoksisiteye Oksitosinin Etkileri Effects of Oxytocin on Glutamate Mediated Neurotoxicity in Neuroblastoma Cell Culture
No Thumbnail Available
Date
2024
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Amaç: Bu çalışmada insan nöroblastoma SH-SY5Y hücre kültüründe glutamat ile oluşturulan nörotoksisitede, oksitosinin nörit büyümesi, hücre canlılığı, hücre proliferasyonu ve apoptozise olan etkilerinin araştırılması ve olası nöroprotektif etkinliğinin gösterilmesi amaçlanmıştır. Yöntem: Oksitosinin, glutamatın toksisitesi üzerine etkileri insan nöroblastoma SH-SY5Y hücre hattında Nörotoksisite Tarama Testi (NTT), apoptotik etkileri terminal deoksinükleotidil transferaz kırık-uç işaretlenmesi (TUNEL) yöntemi ve hücre canlılık testi 3-(4.5-dimetiltiyazol-2-il)-2.5-difeniltetrazolyum bromid (MTT) yöntemi ile incelendi. Nörotoksisite tarama testinde; hücre kültürüne glutamat 32 μM konsantrasyonunda eklenerek nörotoksisite oluşturuldu. Oksitosin 1, 3, 10, 30 ve 100 μM konsantrasyonlarında eklenerek nörit inhibisyonuna etkisi incelendi. Glutamat uygulamasının apoptozise neden olduğu TUNEL yöntemi ile gösterildi. Glutamat ile birlikte oksitosinin farklı dozlarda verildiğinde ortaya çıkan antiapoptotik etki apoptotik endeks ile değerlendirildi. Bulgular: Glutamatın doz bağımlı nörotoksik etki gösterdiği ve 32 μM konsantrasyonda nörit uzamasını %50 oranında azalttığı saptandı. Glutamat ile oluşan nörit uzaması inhibisyonunun oksitosin uygulanarak doza bağımlı olarak azaldığı gösterildi. Özellikle oksitosinin 10 μM konsantrasyonlarından itibaren anlamlı olarak nörit inhibisyonunu azalttığı ve nöroprotektif etki gösterdiği tespit edildi. Hücre canlılık testi (MTT) sonucuna göre glutamatın hücre proliferasyonunu %50 azalttığı konsantrasyon 54 μM olarak belirlendi. Ardından oksitosin uygulaması ile glutamatın hücre proliferasyonuna olan olumsuz etkisini oksitosinin doza bağımlı olarak anlamlı olarak azalttığı görüldü. Sonuç: Glutamatın farklı konsantrasyonlarda hücre çoğalması ve canlılığı üzerinde anlamlı toksik etkiye sahip olduğu; oksitosinin ise glutamat ile oluşan nörit inhibisyonunu azalttığı, nöroprotektif etkisi olduğu, hücre canlılığını artırdığı ve antiapoptotik etkilerinin olduğu gösterildi.