Türkiye'de izole edilen iki farklı toxoplasma gondii suşundan üretilen adjuvanlı takizoit eriyik protein aşılarının uyardığı immün yanıtların karşılaştırılması
No Thumbnail Available
Date
2013
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Toxoplasma gondii, çok geniş konak aralığında, sıcak kanlı hayvanlarda ve kuşlarda enfeksiyon oluşturabilen zorunlu hücre içi bir parazittir. İnsanlarda T.gondii enfeksiyonu, yeni doğanlarda fetal anomalilere yol açan konjenital toksoplazmoz, körlüğe sebep olan retinokoroidit, immün sistem yetmezliği olan kişilerde fatal seyreden toksoplazmik ensefalit ve organ nakli yapılanlarda organ reddi ve ölüme sebep olmaktadır. Farklı T.gondii suşlarının hayvan modellerinde uyardıkları immün yanıta bağlı olarak, oluşturdukları patogenez de değişiklik göstermektedir. Toksoplazmoza karşı korunmada hücresel immün yanıtın daha önemli olduğu belirtilmektedir. Bu çalışmada, ülkemizde izole edilen T.gondii Ankara ve Ege suşlarından üretilen adjuvanlı takizoit protein aşılarının hayvan modellerinde uyardığı hümoral ve hücresel immün yanıt tiplerinin araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmada 6-8 haftalık dişi BALB/c fareler kullanılmış ve aşılama için her biri üç adet fare içeren altı grup oluşturulmuştur. Birinci ve ikinci grup T.gondii Ankara ve Ege (TAnkPE; TEgePE) takizoit eriyiği ile, üçüncü ve dördüncü grup Freund adjuvanı ile birleştirilmiş TAnkPE (TAnkPE-Freund) ve TEgePE (TEgePE-Freund) takizoit eriyiği ile, kontrol grupları olan beşinci ve altıncı gruplar ise PBS ve Freund adjuvanı ile aşılanmıştır. Hayvanların immünizasyonu üç hafta aralıklarla iki kez yapılmıştır. Aşılama öncesi ve her aşılama sonrası alınan serum örneklerinde Western blot yöntemiyle IgG yanıtı, ELISA testi ile IgG1 ve IgG2a yanıtları araştırılmıştır. Hücresel immün yanıtları belirlemek için, hücre kültürü ortamında uyarılan dalak hücrelerinin CD8/CD4 oranı, hücre içi IFN-γ ve IL-4 sitokinleri akış sitometrisi ile ölçülmüştür. Çalışmamızda, Toxoplasma IgG antikorları sadece TAnkPE-Freund aşısı uygulanan grupta saptanmış; IgG1 ve IgG2a antikor yanıtlarının hiçbir aşılama grubunda artmadığı tespit edilmiş, IgG1 veya IgG2a yönünde belirgin bir polarizasyon olmadığı belirlenmiştir. Aşılanan grupların hiçbirisinde uyarılmış dalak hücrelerinde CD8/CD4 oranında değişiklik saptanmamıştır. IFN-γ üretimi sadece TAnkPE-Freund ile aşılanan grupta artarken; IL-4 üretimi TAnkPE-Freund, TEgePE-Freund ve TEgePE ile aşılanan gruplarda artmıştır. Çalışmamızın verileri, TAnkPE-Freund aşısının BALB/c farelerinde IgG ve IFN-γ yanıtlarını artırdığını göstermiş, ancak toksoplazmoza karşı geliştirdiğimiz bu eriyik protein aşılarının koruyucu immün yanıtı yeterince uyarmadıkları saptanmıştır. Bu nedenle ileride yapılacak olan aşı çalışmalarında daha özgül proteinlerin kullanılması yönünde kanaat oluşmuştur.