Trypanosoma cruzi, Leishmania tropica ve Toxoplasma gondii Parazitlerinin J774, Vero ve HeLa Hücre Hatlarında Ex Vivo Kültivasyon Potansiyellerinin Değerlendirilmesi
No Thumbnail Available
Date
2023
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Önemli morbidite ve mortaliteden sorumlu olan ve makrofaj hücreleri içerisinde yerleşim gösteren layşmanyazis etkeni Leishmania tropica, toksoplazmozis etkeni Toxoplasma gondii ve Chagas hastalığı etkeni Trypanosoma cruzi olmak üzere üç zorunlu hücre içi protozoon parazit türü dünya nüfusunun yarısından fazlasını etkilemekte, sosyo-ekonomik ve coğrafi faktörlerle bağlantılı olarak da önemi giderek artan, ihmal edilen paraziter hastalıklara neden olmaktadır. Bu çalışmada, T.cruzi, L.tropica ve T.gondii parazitlerinin J774, Vero ve HeLa hücrelerinde ex vivo kültürlerinin değerlendirilmesi ve virülans özellik- lerini kaybetmeden kısa sürede ve fazla miktarda çoğaltılması amaçlanmıştır. Hücre kültür flasklarında konflüent olarak üretilen J774, Vero ve HeLa hücre hatlarının T.cruzi, L.tropica ve T.gondii parazitleriyle enfekte edilmesi ile ex vivo deney modelleri oluşturulmuştur. Ex vivo kültür yapılmasında bir pasaj yedi gün süresince ve ardışık üçer kez olacak şekilde uygulanmıştır. Her pasaj sonrasında yüzeyden kaldırılan hücreler sekiz odacıklı lamlara ekilmiştir. Giemsa boyalı preparatlar hazırlanarak enfeksiyon oranları ışık mikroskobisinde incelenerek değerlendirilmiştir. Çalışma sonunda üç hücre hattının da T.cruzi, L.tropica ve T.gondii parazitleri ile enfekte edilebildiği ve ardışık pasajlar sonrasında tüm hücre hatlarında enfeksiyon oranlarının arttığı görülmüştür. Ex vivo kültür yapılması sonucunda T.cruzi ve L.tropica suşlarının ürediği en iyi hücre hatlarının sırasıyla J774, Vero ve HeLa, T.gondii suşunun ise sırasıyla HeLa, J774 ve Vero hücre hatları olduğu görülmüştür (p< 0.05). Trypanosoma cruzi, L.tropica ve T.gondii parazitleri J774, Vero ve HeLa hücre hatlarında ex vivo kültür yöntemiyle virülans özelliklerini kaybetmeden kısa sürede ve fazla miktarda olmak üzere başarılı bir şekilde üretilmiştir. Trypanosoma cruzi ve L.tropica parazitleri için ex vivo kültür yapılması potansiyeli en iyi olan hücre hatlarının sırasıyla J774, Vero ve HeLa iken, T.gondii için sıra- sıyla HeLa, J774 ve Vero olduğu görülmüştür. Elde edilen verilerin aşı, ilaç ve yeni tanı kitleri geliştirilmesi konularında yapılacak birçok çalışmaya katkı sağlayacağı düşünülmektedir.