Farklı Sıvı Besiyerlerinde Trypanosoma cruzi’nin Üreme Yoğunluklarının Karşılaştırılması ve Kriyoprezervasyonu
No Thumbnail Available
Date
2018
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Amaç: Bu çalışmada Trypanosoma cruzi (T. cruzi) suşunun gerek kültürde canlılık süresi gerekse üreme hızı bakımından en iyi sıvı besiyeri ortamını tespitetmek ve çalışılan suşun kriyoprezervasyonunu sağlamak amaçlanmıştır.Yöntemler: T. cruzi suşu ticari olarak satın alınan RPMI 1640, Medium 199 (M199), Schneider’s İnsect Medium (SİM), Nutrient Broth (NB), Brain Heartİnfusion Broth (BHİB) olmak üzere beş faklı sıvı kültür ortamında üreme yoğunlukları bakımından değerlendirildi. Parazit kültürleri gün aşırı olarak 24gün boyunca takip edildi. T. cruzi suşunun kriyoprezervasyonu da yapılarak altı ay sonra canlılık durumu test edildi.Bulgular: T. cruzi epimastigotlarının NB ve BHİB besiyerlerinde üremediği tespit edildi. İlk 10 günlük veriler incelendiğinde RPMI 1640, M199, SİMbesiyerlerinde üreme potansiyeli açısından önemli bir fark gözlenmedi. RPMI 1640 besiyeri 12 ile 24’üncü günler arasında en iyi üremenin görüldüğübesiyeri oldu. Parazitin 18’inci gün itibariyle form değiştirerek amastigot forma dönüştüğü, 24’üncü günde amastigot yoğunluğunun en üstseviyeye ulaşarak üremenin durduğu tespit edildi. T. cruzi suşunun kriyoprezervasyonu sonucunda altı ay sonra T. cruzi suşunun canlılığını koruduğutespit edildi.Sonuç: T. cruzi suşunun epimastigot formu ile planlanan araştırmalarda öncelikle RPMI 1640 besiyerinin daha sonra M199 ve SİM besiyerlerinin tercihedilmesinin uygun olacağı kanısına varılmıştır. Epimastigot formu ile yapılacak çalışmalar için çalışma planının 18. güne kadar, amastigot formu ile yapılacakçalışmalarda ise planlamanın 18. günden sonra yapılmasının uygun olacağı düşünülmüştür. Ayrıca T. cruzi suşunun epimastigot formunun %15DMSO yoğunluğunda sıvı azot tankında kriyoprezervasyon yapılarak uzun süre saklanabileceği kanısına varılmıştır.